A Far-red Fluorescent Probe Based on a Phospha-fluorescein Scaffold for Cytosolic Calcium Imaging
Hiroaki Ogasawara, Marek Grzybowski, Riho Hosokawa, Yoshikatsu Sato, Masayasu Taki, Shigehiro Yamaguchi
Chem. Commun., 54, 299-302 (2018).
[DOI: 10.1039/C7CC07344E]
我々はこれまでにキサンテン環内の酸素原子をホスフィンオキシドに置換したフルオレセイン誘導体(ホスファフルオレセイン)を開発し,赤色から深赤色領域に強い吸収および蛍光を示すことを明らかにした.本研究では,高い水溶性を有するフルオレセイン類が細胞質に拡散する性質を利用し,細胞質におけるカルシウムイオン動態を深赤色領域で長時間検出可能な蛍光プローブCaPF-1を開発した.CaPF-1はカルシウム濃度の上昇に伴って,663 nmを極大とする蛍光スペクトルが増大し,蛍光増大率は約13倍であった.細胞膜透過性を付与したCaPF-1のアセトキシメチルエステル体CaPF-1-AMを用いてHeLa細胞を染色し,ヒスタミン刺激によって引き起こされるカルシウム濃度変化を追跡したところ,カルシウムオシレーションを捕らえることに成功した.長波長励起が可能で,深赤色領域に蛍光を示す本プローブは,培養細胞のみならず,組織切片など生体深部のカルシウムイオンダイナミクスを検出するうえで有用なツールになりうると期待できる.
We disclose the development of far-red-emitting fluorescent probe, CaPF-1, for cytosolic calcium ion based on phospha-fluorescein scaffold and its application for the detection of intracellular calcium concentration change. The CaPF-1 could be excited with red-region laser (633 or 635 nm) and showed turn-on fluorescence in the far-red region upon calcium ion complexation. Based on this fluorescence behavior, we utilized the CaPF-1 for cell-imaging experiments. The cytosolic diffusible characteristic of CaPF-1 enabled us to visualize the histamine-induced calcium oscillation using CaPF-1.
細胞内カルシウムイオンを検出するための深赤色蛍光プローブ
2018/01/19